BrdU 細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑是用于細(xì)胞增殖的產(chǎn)品，染料修飾的脫氧尿苷5'-三磷酸（例如氨基烯丙基dUTP）可用于通過(guò)常規(guī)酶促摻入方法（例如逆轉(zhuǎn)錄，切口平移，隨機(jī)引物標(biāo)記或PCR）產(chǎn)生含染料的DNA。該酶熒光標(biāo)記方法廣泛用于FISH探針和基于微陣列的實(shí)驗(yàn)。

用于染色細(xì)胞的樣品方案

以下程序適用于大多數(shù)細(xì)胞類(lèi)型。 生長(zhǎng)培養(yǎng)基，細(xì)胞密度，其他細(xì)胞類(lèi)型的存在和其他因素可能影響B(tài)rdu摻入。

1）制備1-10mM DMSO儲(chǔ)備溶液。 如果儲(chǔ)存在-20°C，DMSO儲(chǔ)備液可以保存6個(gè)月。

2）通過(guò)離心沉淀細(xì)胞并將細(xì)胞重懸于完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。 培養(yǎng)物中的貼壁細(xì)胞可以在蓋玻片上或細(xì)胞培養(yǎng)孔中原位染色。

3）使用5和20μM之間的濃度添加Brdu染色并孵育60分鐘過(guò)夜作為指導(dǎo)。 最佳孵育時(shí)間取決于細(xì)胞類(lèi)型和實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)。

4）用70-80％酒精或酸 - 乙醇固定細(xì)胞20-30分鐘。

5）用PBS洗滌（3次，每次2分鐘）。

6）繼續(xù)進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)。