PhosphoWorks 發(fā)光法ATP檢測(cè)試劑盒是用于檢測(cè)ATP的試劑盒,腺苷三磷酸(ATP)在細(xì)胞能量學(xué),代謝調(diào)節(jié)和細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)中起重要作用。 PhosphoWorks ATP檢測(cè)試劑盒提供快速,簡(jiǎn)單和均勻的發(fā)光檢測(cè),用于測(cè)定哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性??梢砸苑奖愕?span style="box-sizing: border-box; animation-fill-mode: both; font-family: calibri;">96孔和384孔微量滴定板形式進(jìn)行測(cè)定。 該測(cè)定的高靈敏度允許在許多生物系統(tǒng),環(huán)境樣品和食物中檢測(cè)ATP。 這種PhosphoWorks ATP檢測(cè)試劑盒具有長(zhǎng)達(dá)4小時(shí)的穩(wěn)定發(fā)光信號(hào)。 它具有穩(wěn)定的發(fā)光,不需要混合或分離,并配制成具有最小的手動(dòng)操作時(shí)間。
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
C0711 | PhosphoWorks 發(fā)光法ATP檢測(cè)試劑盒 *溫和發(fā)光* | 1 Plate | 1896RMB |
溶液制備
1.將整瓶10 mL反應(yīng)緩沖液(組分C)轉(zhuǎn)移到ATP(組分B)中并充分混合。
2.將20μLATP監(jiān)測(cè)酶(組分A)加入到組分B + C的瓶中并充分混合以制備ATP工作溶液。 注意:避免來自外源生物來源的潛在污染。
樣品試驗(yàn)方案
1運(yùn)行ATP測(cè)定:
1.1用測(cè)試化合物處理細(xì)胞(或樣品),在96孔板中加入10μL10X化合物,或在所需化合物緩沖液中加入5μL5X化合物用于384孔板。對(duì)于空白孔(沒有細(xì)胞的培養(yǎng)基),加入相應(yīng)量的化合物緩沖液。
1.2將細(xì)胞板在37℃,5%CO 2培養(yǎng)箱中孵育所需的一段時(shí)間,例如24,48或96小時(shí)。
1.3向每個(gè)孔中加入100μL(96孔板)或25μL(384孔板)的ATP工作溶液。
1.4在室溫下孵育10-20分鐘。
1.5用標(biāo)準(zhǔn)發(fā)光計(jì)監(jiān)測(cè)發(fā)光強(qiáng)度。
2.生成標(biāo)準(zhǔn)ATP校準(zhǔn)曲線:
如果需要計(jì)算樣品中ATP的絕對(duì)量,則應(yīng)與上述分析一起生成ATP標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2.1通過包含不含ATP的樣品(作為對(duì)照)用于測(cè)量背景發(fā)光,在含有0.1%BSA的PBS緩沖液中制備一系列ATP稀釋液。注意:通常ATP濃度從1 nM到10μM是合適的。
2.2將相同量的稀釋的ATP溶液加入空板中(對(duì)于96孔板為100μL或?qū)τ?84孔板為25μL)。
2.3加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的ATP工作溶液。
2.4將反應(yīng)混合物在室溫下孵育10至20分鐘。
2.5用標(biāo)準(zhǔn)光度計(jì)監(jiān)測(cè)發(fā)光強(qiáng)度。
2.6生成ATP標(biāo)準(zhǔn)曲線。